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cryo-EM本身怎么改变?冷冻电子显微镜新技术、新方法专题报告会隆重召开!

2019/6/21编辑:Ma Liang 人气:1561

  【导读】6月17日,举行了关于冷冻电子显微镜新技术和新方法的专题报告,涵盖样品制备、电子显微镜、数据处理等方面。。与会专家提出一个问题:cryo-EM正在改变结构生物学。什么可能改变cryo-EM本身?
6月17日,第六届全国冷冻电子显微镜与结构生物学研讨会隆重举行。研讨会由中国生物物理学会冷冻电子显微镜分会(以下简称“中国冷冻电镜分会”)主办,北京大学承办,中国电子显微镜学会低温电镜专业委员会协办。下午,冷冻电子显微镜学新技术新方法专题报告会作为大会三大专题之一,在清华大学生命科学学院王宏伟教授和北京大学生命科学学院高宁教授联合主持下,顺利召开。本专题研讨会围绕“冷冻电子显微镜学新技术新方法”共安排了12个专题报告,报告内容涵盖样品制备、电镜技术、数据处理等各个方面,吸引了来自中国大陆、中国香港、美国等地的400多名代表与会。


研讨会现场

作为结构测定技术,X射线晶体学和冷冻电子显微镜(cryo-EM)互为补充,随着晶体学和冷冻电子显微镜分辨率之间的差距不断缩小,大分子复合物的cryo-EM图可以作为解决高分辨率结构晶体衍射相位问题的初始模型。香港大学郝权教授在报告《Using Cryo-EM maps for X-ray structure determination》中介绍了一种将X射线晶体学与低温EM相结合的混合方法,用于确定结构。该方法的工作流程包括三个步骤:(1)Cryo-EM图替换:通常应用FSEARCH找到Cryo-EM图的正确翻译和取向,并生成初始的低分辨率图。(2)相位扩展:使用Phenix.resolve进行NCS平均,将Cryo-EM图计算的相位扩展到高分辨率X射线数据。(3)构建模型: IPCAS通常用相位扩展映射方法生成初始模型,并通过迭代完成模型优化。郝权在报告中展示了一些应用实例。

  如何从冷冻电子显微镜图像中准确、自动地选择数百万幅生物大分子粒子图像一直是冷冻电子显微镜领域需要解决的关键问题之一;深度学习技术可以有效提高单粒子图像选择的准确性。然而,由于粒子图像噪声高,训练样本不足,基于深度学习的粒子选择工具在实际应用中存在很多问题。。中国科学院计算技术研究所张法副研究员在《基于深度分割网络的冷冻电镜颗粒图像自动挑选方法》报告中首先介绍一种基于深度分割网络的全自动冷冻电镜颗粒图像挑选算法,将图像分割思想应用于粒子图像的选择,解决了训练样本不足的问题。实现了粒子图像的准确、高效和全自动选择。

  北京大学毛有东研究员在《All roads lead to ROME: from Cryo-EM imaging to complex dynamics》报告中首先提出一个问题: cryo-EM正在改变结构生物学。什么可能改变cryo-EM本身? 毛有东提出,假设cryo-EM单粒子图像的性质与非平衡统计力学开发的理论和方法相适配,非平衡统计力学中的原理和方法可能会进一步发展cryo-EM。报告介绍了他的小组中正在开发的几种方法,这些方法试图应用非平衡统计机理来推动cryo-EM发展,以用于分析原子级别的极端系统。

  质子连接的单羧酸转运蛋白(MCT)催化单羧酸盐(例如丙酮酸盐和乳酸盐)跨质膜的有效转运。该过程对细胞代谢,细胞间代谢传递和细胞内稳态至关重要。教授在《Cooperative transport mechanism of human monocarboxylate transporter 2 elucidated by Cryo-EM structure》报告中,叶升通过分析人单羧酸转运蛋白2(MCT2)的丙酮酸转运过程,显示运输活性对单羧酸盐浓度的陡峭依赖性。MCT2的低温电子显微结构进一步表明,MCT2的浓度敏感性源于其运输过程中的强亚基配合。该结构显示出向内开放的空腔以及质子和单羧酸结合位点。

  此外,北京大学彭海琳教授作《Scalable fabrication of high-quality graphene grids for atomic-resolution EM》报告,分享了已经批量化生产的超纯净石墨烯载网及其技术特点;清华大学李雪明研究员作《Make MicroED an efficient tool for ultrahigh-resolution structural determination》报告,分享了利用低端120kV电镜结合CCD相机的廉价方案用于解决有机物的超高分辨率结构分析的思路和方法;湖南师范大学刘红荣教授作《Symmetry-mismatch and local three-dimensional reconstruction of aquareovirus》;中国科学院生物物理研究所孙飞研究员的《Sample preparation techniques for in vitro and in situ Cryo-EM study》(朱平代为演讲);中国科学院生物物理研究所章新政研究员作《High-quality, high-throughput Cryoelectron microscopy data collection via beam tilt and astigmatism-free beamimage shift》报告;清华大学陈柱成研究员作《Mechanism of ATP-dependent Chromatin Remodeling: 1bp at a time》报告。Thermo Fisher Scientific的Abhay Kotecha和Gatan的潘明分别介绍了各自公司在新技术、新方法方面的最新成果。

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(来源: 仪器信息网 )

标签:冷冻电子显微镜,冷冻扫描电子显微镜

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